A história conta das aventuras dos dois irmãos que vivem na cidade de Danville, que estão em suas férias, e como geralmente não tem não nada para fazer, inventam uma coisa diferente para fazer, como criar um monstro, construir uma montanha-russa gigante, visitar a lua ou, até mesmo, projetar um show de rock, tudo isso durante seus três meses de férias.
A irmã Candace, está sempre tentando dedurar os irmãos para a mãe, e as vezes para o pai, mas não consegue, pois Perry o ornitorrinco (que sempre some, e aparece no final do episódio) tem a missão de derrotar o Dr. Heinz Doofenshmirtz e a briga dos dois acaba destruindo as invenções de Phineas e Ferb.
Outra personagem é Isabella, uma escoteira que é apaixonada por Phineas. Outro amigo é o Buford, um implicante que só se dá bem com seu amigo
Beef, e também o Baljeet que sempre aparecem nas muitas aventuras de Phineas e Ferb.
Phineas: É o irmão mais extrovertido e sociável, normalmente é ele quem tem as idéias sobre o que ele e Ferb vão construir.Seu maior defeito é falar demais.É estranhamente o único que entende tudo o que Ferb quer dizer, é revelado de que no futuro ganha muitos prêmios nobel ( o esperado de alguém tão inteligente).
Ferb: É mais tímido do que Phineas, não fala quase nada(às vezes porque Phineas fala demais) e quase sempre cuida da parte técnica do que estão construindo. Quando quer tem uma voz incrível tanto para falar quanto para cantar.
Candace: É a irmã mais velha de Phineas e Ferb e tem 16 anos. Está sempre tentando mostrar para sua mãe as coisas extraordinárias que Phineas e Ferb constroem, na esperança de que ela os coloque de castigo, mas tudo sempre desaparece misteriosamente quando a mãe deles aparece. Apesar de tudo, Phineas e Ferb não parecem se importar que sua mãe veja suas construções. No fundo de tudo morre de inveja deles, de poderem fazer o que querem sem medo e com determinação e tranquilidade o contrário dela que nem conseguiu se declarar ao seu amado Jeremy, fora isso ela teme que algo aconteca a eles (instinto protetor de irmão/irmã mais velho/velha) fato percebido quando ela diz que suas invenções são PERIGOSAS e IRRESPONSÁVEIS.
Isabella: É líder do grupo das Garotas Companheiras e grande amiga de Phineas e Ferb.Phineas parece não reparar que ela tem uma quedinha por ele. Acompanha Phineas e Ferb em várias aventuras. Seu primeiro beijo com Phineas foi no primeiro filme da série que ele parece ter gostado mas devido a alguns fatos se esqueceram disso.
Buford: Parece durão por fora,mas por dentro é muito sensível e amigo de Phineas e Ferb.Os acompanha em várias aventuras, assim como Isabella.
Baljeet: É um garoto tímido e inteligente que morre de medo de Buford, porém mesmo assim os dois são amigos. Acompanha Phineas e Ferb em suas aventuras.
Mãe de Phineas, Ferb e Candace: Nunca vê as construções de Phineas e Ferb que Candace tenta lhe mostrar,pois elas sempre desaparecem no último minuto.Acha que Candace está imaginando coisas e costuma lhe dizer que ela tem uma imaginação muito fértil.No passado fez parte de um grupo musical de muito sucesso.
Perry, o Ornitorrinco ou Agente P: É o ornitorrinco verde de estimação da família.Parece normal(tanto quanto um ornitorrinco verde de estimação pode parecer normal),mas na verdade é um agente secreto,o Agente P,que luta para impedir os planos do malvado vilão Doofeshnmirtz(se pronuncia Doofensmitz).Seu maior defeito é obedecer cegamente as ordens de seu chefe,uma vez que os planos de Doofeshnmirtz nem sempre tem a ver com dominio,mas com acerto de contas com alguem que o magoou no passado,e que o certo seria tentar entendê-lo em vez de detê-lo. Mas tem um lado vulnerável, seus donos, os ama muito e nem pensa em se separar deles, seu maior medo é o de ser descoberto e ter que ir embora para sempre.
Heinz Doofeshnmirtz: É um malvado vilão que sempre arquiteta planos para dominar a área dos três estados ou se vingar de algo que o feriu no passado.Porém,sempre é impedido pelo Agente P(vide Perry o Ornitorrinco ou Agente P). É separado e tem uma filha da idade de Candace,chamada Vanessa,que as vezes também é sua assistente.
Major Monograma:é o líder da organização secreta da qual Perry faz parte.Sempre entra em contato com ele para que detenha os ¨malvados¨ planos de Doofeshnmirtz.Sua agência só emprega animais e às vezes parece que ele manda Perry só de bobeira,para lhe encher a paciência ou talvez ele simplesmente não goste de Doofeshnmirtz.Desconfia de absolutamente tudo que Heinz esteja fazendo escondido (como preparar uma festa surpresa para sua filha) .
